RNA Pull down

1. 技术简介

  随着高通量测序技术的发展,越来越多的长链非编码RNAlong non-coding RNA,lncRNA)被注释出来,RNA pull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术,已成为研究焦点。RNA pull-down是以目的RNA序列为中心,寻找或验证与该RNA片段结合的蛋白质。对目的RNA片段产物进行生物素标记,通过链霉亲合素固定到磁珠上,当目的RNA与蛋白质发生结合后,再将其余游离的蛋白质洗脱,即得到核酸与蛋白质结合产物。

用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。

 

 


 

 

2. 技术原理

RNA Pull down实验原理

 

 


 

 

3. 实验流程

 

 

 


 

 

4.客户提供

(1)基因信息(物种,Genebank登录号或者序列);

(2)基因模板,如无可以委托我们进行全基因合成;

(3)细胞样本或者组织样本。

 

 


 

 

5. 结果交付

(1)RNA凝胶电泳图;

(2)RNA Pull down后的SDS PAGE电泳图;

(3)WB或者质谱检测数据;

(4)实验报告,包含实验仪器、材料和试剂、实验方法和数据分析。

 

 

 

 

2022年4月27日 09:26
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